Αντιδραστηρία

NaOH 20%
CuSO4.5H2O 25%
K2HPO4 Μ/15 pH= 4,5

 

Διαδικασία

  • Παρασκευάζονται πρότυπα διαλύματα αλβουμίνης (Bovine Serum Albumin - B.S.A.) συγκέντρωσης 0-10 mg/ml, όγκου 1 ml σε δοκιμαστικούς σωλήνες.
  • Σε κάθε δοκιμαστικό σωλήνα προστίθενται 3 ml NaOH 20% και 0,75 ml K2HPO4 Μ/15 pH= 4,5.
  • Ακολουθεί βρασμός για 5 min και ψύξη των δειγμάτων σε θερμοκρασία περιβάλλοντος.
  • Προστίθενται 0,125 ml CuSO4.5H2O 25% και ακολουθεί περιοδική ανάδευση σε αναδευτήρα vortex κατά τη διάρκεια 10min επώασης σε θερμοκρασία περιβάλλοντος.
  • Ακολουθεί φυγοκέντρηση για 20 min σε 4000 rpm.
  • Μετράται η απορρόφηση (A) κάθε δείγματος σε λ=540 nm.
  • Χαράσσεται η πρότυπη καμπύλη αναφοράς.
  • Σε σωλήνα φυγοκέντρου τοποθετούνται 5-10 mg ξηρής βιομάζας, που περιέχει 1,5-8 mg πρωτεΐνη.
  • Μετρώνται οι απορροφήσεις των άγνωστων δειγμάτων και η συγκέντρωση της πρωτεΐνης προσδιορίζεται από την πρότυπη καμπύλη αναφοράς.

Σημείωση: Σε περίπτωση που η βιομάζα περιέχει σημαντική ποσότητα λίπους του προσδιορισμού της πρωτεΐνης προηγείται απομάκρυνση του λίπους με εκχύλιση της βιομάζας με οργανικούς διαλύτες.

Τα cookies μας διευκολύνουν να σας παρέχουμε τις υπηρεσίες μας. Με τη χρήση των υπηρεσιών μας επιτρέπετε να χρησιμοποιούμε cookies.